可見分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸、蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。基本原理：分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息，可以用標準光譜圖再結合其它手段進行定性分析。朗伯-比爾定律：當一束平行單色光通過含有吸光物質(zhì)的稀溶液時，溶液的吸光度與吸光物質(zhì)濃度、液層厚度乘積成正比，即A=kcl式中比例常數(shù)k與吸光物質(zhì)的本性，入射光波長及溫度等因素有關。c為吸光物質(zhì)濃度，l為透光液層厚度。

　　可見分光光度計正常工作的環(huán)境要求如下：

　?。?）避開高溫高濕環(huán)境。請不要將儀器安裝在高溫高濕的環(huán)境下。儀器必須在5℃~35℃度溫度、≤85%的濕度條件下安裝使用。

　?。?）避免儀器受外界磁場干擾。請盡量遠離發(fā)出磁場、電場、高頻波的電器裝置。

　?。?）遠離腐蝕氣體。請不要將儀器安裝在空氣中氯氣、鹽酸氣體、硫化氫氣體、亞硫酸氣體等腐蝕性氣體超標場所。

　?。?）儀器應放置在穩(wěn)定的工作臺上。放置儀器的工作臺應水平、穩(wěn)定、不能有振動；儀器的風扇附近應留有足夠的空間，使其排風順暢。

　?。?）不要與其他用電設備共用電源插座。請為儀器單獨設計一個電源插座，不要與其它用電設備共用，電源應具備保護地線。

　?。?）不要將儀器放置在陽光直接照射的地方。

　?。?）避免灰塵多環(huán)境。

　　可見分光光度計的使用方法：

　　1、在接通電源之前，電表的指針必須位于“0”刻線上，否則應旋動電表上的校正螺絲調(diào)節(jié)到位。

　　2、打開比色皿室的箱蓋和電源開關，使光電管在無光照射的情況下預熱15分鐘以上。

　　3、旋轉波長調(diào)節(jié)器，選擇測定所需的單色光波長。選擇適當?shù)撵`敏度，一般先將靈敏度旋鈕至中間位置，用零點調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)電表指針至T值為0%處。若不能調(diào)到，應適當增加靈敏度。

　　4、放入空白溶液和待測溶液，使空白溶液置于光路中，蓋上比色皿室箱蓋，使光電管受光，調(diào)節(jié)光量調(diào)節(jié)旋鈕使電表指針在T值為100%處。

　　5、打開比色皿室箱蓋（關閉光門），調(diào)節(jié)零點調(diào)節(jié)旋鈕使針在T值為0%處，然后蓋上箱蓋（打開光門），調(diào)節(jié)光量調(diào)節(jié)旋鈕使指針在T值為100%處。如此反復調(diào)節(jié)，直到關閉光t0=ITI門進和打開光門時指針分別指在T值為0%和100%處為止。

　　6、將待測溶液置于光路中，蓋上箱蓋，由此時指針的位置讀得待測溶液的T值或A值。

　　7、測量完畢后，關閉開關取下電源插頭，取出比色皿洗凈擦干，放好。蓋好比色皿暗箱，蓋好儀器。